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IMPORTÂNCIA Uma variante rara de penfigóide de membrana mucosa (MMP) é caracterizada por autoanticorpos circulantes anti-laminina 332 (Lam332) e parece estar associada a neoplasmas malignos concorrentes.

OBJETIVO Determinar a prevalência eo significado clínico da detecção de autoanticorpos anti-Lam332 de uma grande série de pacientes com MMP. PROJETO Estudo retrospectivo multicêntrico.

DEFINIÇÃO Quatro centros nacionais franceses para doenças bolhosas auto-imunes.

PARTICIPANTES Foram incluídos cento e cinquenta e quatro pacientes com indivíduos MMP e 89 que servem como controles.

INTERVENÇÕES As amostras de soro foram analisadas por um novo ensaio imunoenzimático ligado a enzimas Lam332 (ELISA); Os dados clínicos e imunopatológicos foram obtidos a partir dos registros médicos dos pacientes.

MEDIDAS DE SAÍDA PRINCIPAIS Os escores de Lam332 ELISA foram avaliados em relação a características clínicas, imunofluorescência indireta padrão e de divisão de sal, e ensaios de penfigóide bolhosa (BP) 230 e BP180-NC16A.

PREÇO/ RESULTADOS O resultado do ELISA Lam332 foi positivo (≥9 U / mL) em 20.1% de amostras de soro de doentes com MMP, 1 de 50 com penfigoide bolhoso (BP), nenhum de 7 com pênfigo e 3 de 32 outros controlos. Não foi evidenciada relação entre um escore ELISA positivo Lam332 e a idade; razão sexual; envolvimento oral, ocular, genital, cutâneo ou esofágico / laríngeo; neoplasia maligna interna; ou pontuação BP180 ELISA. A imunofluorescência indirecta da pele saltada e os resultados de ELISA BP230 foram mais frequentemente positivos quando os resultados de Lam332 ELISA foram positivos (P = .04 e .02, respectivamente). Pacientes com uma pontuação positiva para Lam332 ELISA frequentemente apresentavam MMPs mais graves (67.8% vs 47.2%; P = .04).

CONCLUSÕES E RELEVÂNCIA Os resultados deste novo ELISA mostraram que os autoanticorpos anti-Lam332 no soro são detectados em 20.1% de pacientes com MMP. Os autoanticorpos anti-Lam332 são detectados principalmente em pacientes com MMP grave, mas não preferencialmente naqueles com neoplasia maligna. A associação entre autoanticorpos anti-Lam332 e anti-BP230 pode surgir de um fenômeno de espalhamento de epítopos.

Dermatologia JAMA (Chicago, Ill.)

O penfigoide bolhoso é uma doença auto-imune de bolhas caracterizada pela presença de autoanticorpos circulantes que reconhecem proteínas específicas da epiderme e da junção dermoepidérmica. O diagnóstico é baseado em critérios clínicos e pesquisas laboratoriais, nomeadamente histologia, imunofluorescência direta e indireta e ELISA. Este estudo descreve um novo teste de imunofluorescência para a determinação paralela de anti-BP180 e anti-BP230 com base em substratos antigênicos recombinantes. O objetivo do estudo foi detectar os autoanticorpos BP180 e BP230 pela tecnologia BIOCHIP usando uma proteína recombinante BP180-NC16A especialmente desenvolvida e células que expressam o fragmento de antígeno BP230-gc. Pacientes 18 com penfigóide bolhoso foram incluídos no estudo. Os anticorpos para BP180 foram detectados pela técnica BIOCHIP em 83.33% de pacientes com penfigóide bolhoso confirmado clínico, sorológico e imunohistológico, enquanto os autoanticorpos contra BP230-gC foram detectados apenas em 39% de pacientes. A detecção de anti-BP180-NC16A e anti-BP230-gC por um novo imunoensaio baseado em biochip é uma alternativa adequada à imunofluorescência indireta e ao ELISA. Este método tem a vantagem de discriminar facilmente as diferentes especificidades de autoanticorpos. O método BIOCHIP é mais rápido, mais barato e fácil de usar quando comparado com a abordagem ELISA. Por esse motivo, o novo método poderia ser usado como um teste de triagem inicial para identificar pacientes com penfigóide bolhoso, e os resultados duvidosos poderiam então ser confirmados por ELISA.

Artigo completo (gratuito) encontrado aqui: http://www.hindawi.com/isrn/dermatology/2012/237802/

A síndrome de Senear-Usher ou o pênfigo eritematoso é uma patologia que se sobrepõe clinicamente e sorologicamente com o pênfigo foliaceus e o lúpus eritematoso. As biópsias cutâneas de pacientes com pênfigo eritematoso revelam acantólise e depósitos de imunoglobulinas em desmossomos, e são positivos no teste de banda de lúpus. No presente trabalho, determinamos se os autoanticorpos associados com o pênfigo eritematoso visavam um único antígeno ou antígenos múltiplos como resultado da estimulação de clones de células B independentes. O nosso artigo atual demonstra que pacientes com pênfigo eritematoso produzem anticorpos antiepiteliais específicos para desmogleína 1 e 3 e anticorpos antinucleares específicos para os antígenos de DNA Ro, La, Sm e de cadeia dupla. Após a eluição de anticorpos anti-epiteliais ou anti-nucleares específicos, que foram recuperados e testados usando ensaios de dupla fluorescência, demonstrou-se falta de reatividade cruzada entre desmossomas e antígenos de lúpus nucleares e citoplasmáticos. Este resultado sugere que os autoanticorpos no pénfigo eritematoso são dirigidos contra diferentes antígenos e que esses auto-anticorpos são produzidos por clones independentes. Dado estes dados clínicos e sorológicos, sugerimos que o pênfigo eritematoso se comporta como uma doença auto-imune múltipla.

Artigo completo pode ser visto em: http://www.hindawi.com/journals/ad/2012/296214/

A base molecular da heterogeneidade da doença em condições auto-imunes como Pemphigus vulgaris é mal compreendida. Embora o desmoglein 3 (Dsg3) tenha sido bem estabelecido como alvo primário de autoanticorpos de imunoglobulina (Ig) em PV, permanecem várias questões quanto à distribuição geral de subtipos anti-Dsg3 Ig entre os subconjuntos de pacientes e uma controvérsia considerável sobre se um interruptor de isotipo pode ser observado entre as fases da atividade da doença. Para abordar sistematicamente as questões pendentes relacionadas à especificidade do isotipo de Ig em PV, analisamos os níveis de IgA, IgM, IgG1, 2, 3 e 4 anti-Dsg3 por ELISA em amostras de soro 202 obtidas de pacientes 92 com diferentes perfis clínicos com base em um conjunto de variáveis ​​definidas (atividade, morfologia, idade, duração) e parâmetros clínicos constantes (tipo HLA, gênero, idade de início) e amostras de soro 47 de controles HLA-combinados e não combinados. Nossas descobertas fornecem suporte para estudos anteriores que identificam IgG4 e IgG1 como os anticorpos predominantes em PV com níveis significativamente maiores em pacientes ativos que remitentes. Não vemos evidências de uma mudança de isotipo entre as fases da atividade da doença e a remissão, e ambos os subtipos IgG4 e IgG1 permanecem elevados em pacientes remitentes em relação aos controles. Entretanto, achamos que o IgG4 é o único subtipo que distingue ainda mais os subgrupos de pacientes com PV em função de diferentes morfologias da doença, duração da doença e tipos HLA. Esses dados fornecem uma visão mais aprofundada sobre os mecanismos imunológicos responsáveis ​​pela expressão fenotípica da doença e contribuem para o maior esforço para estabelecer imunoprofilos abrangentes subjacentes à heterogeneidade da doença para facilitar intervenções terapêuticas cada vez mais específicas e individualizadas.

Artigo completo disponível em: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22779708

MedWire News: Pesquisadores identificaram o alvo primário dos autoanticorpos encontrados no soro de pacientes portadores do distúrbio cutâneo com bolhas, pênfigo vulgar (PV).

Os pacientes PV desenvolvem anticorpos contra as proteínas desmoglein (DSG) 1 e 3, que ajudam as células epidérmicas a manterem-se unidas e a manter a integridade da pele, causando bolhas dolorosas na pele e membranas mucosas.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Roma, Itália) e colegas descobriram que a interface cis-adesivo do domínio extracelular DSG3 (EC) 1 é o principal alvo do autoanticorpo PV (A) 224 gerado no soro de pacientes com PV.

As terapias existentes para a condição visam todo o sistema imunológico, mas isso pode causar problemas com efeitos colaterais e pode resultar em pacientes vulneráveis ​​a infecções.

Para identificar o desencadeante da produção de autoanticorpos em PV mais especificamente, Zambruno e equipe isolaram anticorpos 15 de imunoglobulina (Ig) G específicos para DSG3 de dois pacientes com o transtorno.

Destas, três camadas interrompidas de células da pele no laboratório e duas eram patogênicas quando expressas em um modelo de transferência passiva de murino.

Os epitopos reconhecidos pelos anticorpos patogênicos fotovoltaicos foram isolados nos subdomínios DSXXUMUM EC3 e EC1 e um ensaio serológico específico foi usado para identificar o alvo do PVA2 como sendo a interface cis-adesivo em EC224.

Os pesquisadores sugerem que a autoreatividade observada na PV é devida a mutações somáticas que são geradas por um antígeno diferente de DSG3, já que a ligação ao DSG3 desapareceu quando as mutações somáticas reverteram para a sequência da linha germinal.

"A identificação de uma região imunodominante visada por anticorpos patogênicos tem implicações para o diagnóstico de PV e abre novas perspectivas para o estabelecimento de abordagens terapêuticas para o tratamento de pacientes com PV", escreva Zambruno e equipe na Journal of Clinical Investigation.

"Finalmente, a versão gerada dos autoanticorpos PV pode levar à identificação dos antígenos que eventualmente levam ao desenvolvimento desta doença que ameaça a vida".

medwireNews (www.medwire-news.md) é um serviço de notícias clínicas independente fornecido pela Springer Healthcare Limited. © Springer Healthcare Ltd; 2012

Leia em: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

fundo Pênfigo vulgar (PV) e pênfigo foliáceo (PF) são doenças potencialmente fatais causadas por autoanticorpos dirigidos às proteínas de adesão à desmogleína (Dsg). Estudos anteriores mostraram uma predominância de IgG4> IgG1 de anticorpos anti-Dsg em pênfigo; no entanto, nenhum estudo examinou os níveis séricos totais de IgG4 no pênfigo. O IgG4 é induzido por estimulação antigênica crônica, que pode ocorrer com bolhas persistentes na pele e potencialmente elevar o IgG4 sérico total em relação a outras subclasses de IgG em pacientes com pênfigo.

Objetivos O objetivo principal do estudo foi quantificar subclasses de IgG específicas de Dsg e total em pacientes com pênfigo.

Métodos As subclasses de IgG e IgG1 e IgG4 específicos de Dsg foram quantificadas em pacientes com PV e PF e em soros de controles combinados por idade utilizando um ensaio de imunossorrente ligada à enzima de subclasse. A eficácia da depleção de IgG4 no bloqueio da patogenicidade de IgG em PV foi determinada utilizando um ensaio de dissociação de queratinócitos.

Resultados Os anticorpos específicos de Dsg compreendiam uma mediana de 7 · 1% e 4 · 2% de IgG4 total em pacientes com PV e PF, respectivamente, com enriquecimento de oito vezes e quatro vezes em IgG4 vs. IgG1. O IgG4 sérico total, mas não outras subclasses de IgG, foi enriquecido em pacientes com PV e PF em comparação com os controles combinados com a idade (P = 0 · 004 e P = 0 · 005, respectivamente). A depleção de IgG4 de soros de PV reduziu a patogenicidade em um ensaio de dissociação de queratinócitos e mostrou que o IgG4 purificado por afinidade é mais patogênico que outras frações de IgG sérica.

Conclusões Os autoanticorpos específicos de Dsg são significativamente enriquecidos em IgG4, o que pode explicar o enriquecimento de IgG4 sérico total em alguns pacientes com pênfigo. Ao preferencialmente direcionar anticorpos imunes auto-imunes em vez de benéficos, as terapias direcionadas a IgG4 podem oferecer opções de tratamento mais seguras para o pênfigo.

Artigo completo disponível em: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-2133.2012.11144.x/abstract

Pemphigus vulgaris (PV) é uma doença de bolhas autoimunes da pele e das membranas mucosas causadas por autoanticorpos às proteínas da família desmoglein (DSG) DSG3 e DSG1, levando a perda de adesão celular de queratinócitos. Para saber mais sobre autoanticorpos PV de patogenicidade, isolamos os anticorpos 15 IgG específicos para DSG3 de pacientes com 2 PV. Três anticorpos interromperam as monocapas de queratinócitos in vitro e 2 eram patogênicos em um modelo de transferência passiva em camundongos neonatais. Os epítopos reconhecidos pelos anticorpos patogênicos foram mapeados para os subdomínios extracelulares 3 (EC1) e EC1 DSG2, regiões envolvidas em interações cis-adesivo. Usando um ensaio sorológico específico do local, descobrimos que a interface cis-adesivo no EC1 reconhecida pelo anticorpo patogênico PVA224 é o principal alvo dos autoanticorpos presentes no soro de pacientes com PV. Os autoanticorpos isolados usaram diferentes genes da região variável de cadeia pesada e leve e apresentaram altos níveis de mutações somáticas em regiões determinantes complementares, consistentes com a seleção antigênica. Notavelmente, a ligação ao DSG3 foi perdida quando as mutações somáticas foram revertidas para a sequência da linha germinal. Esses achados identificam a interface cis-adesivo do DSG3 como a região imunodominante alvo de anticorpos patogênicos em PV e indicam que a autoreatividade depende de mutações somáticas geradas na resposta a um antígeno não relacionado ao DSG3.

Pemphigus vulgaris (PV) é uma doença de bolhas autoimunes e ameaçadoras para a pele e mucosas causadas por autoanticorpos que se ligam às moléculas de adesão de células celulares de caderina desmoglein 3 (DSG3) e DSG1, os principais constituintes de desmossomas e causam a perda de adesão celular de queratinócitos. O papel crítico dos autoanticorpos na patogênese PV é suportado pelas observações de que a atividade da doença se correlaciona com os títulos de anticorpos anti-DSG3, que os recém-nascidos de mães com PV ativado exibem bolhas causadas pela transferência placentária de anticorpos maternos e que lesões tipo pemphigus são induzida em camundongos neonatais por transferência passiva de IgG anti-DSG3 de pacientes com PV.

Na pele, o DSG3 é principalmente expresso nas camadas basal e suprabasal, enquanto o DSG1 é predominantemente expresso nas camadas epidérmicas superiores. Em contraste, em epitélios estratificados não codornizados, como a mucosa oral, o DSG3 é altamente expresso em todo o epitélio, enquanto o DSG1 é expresso em um nível muito mais baixo. O padrão de expressão diferencial de DSG1 e DSG3 é responsável por variantes clínicas do pênfigo: anticorpos contra DSG3 estão presentes na forma mucosa, enquanto os anticorpos para DSG3 e DSG1 estão associados a lesões mucocutâneas.

DSG3 é uma glicoproteína de membrana de ligação ao cálcio com um domínio extracelular compreendendo subdomínios distintos de 5 (EC1-EC5), e é sintetizada como proproteína, que é processada no aparelho de Golgi pela remoção de um propéptido antes de transportar para a superfície celular. A clivagem do propeptídeo ocorre a montante de um resíduo de triptofano conservado no subdomínio EC1, desenmascarando resíduos críticos para a formação de interações homofílicas com DSG3 em células opostas. Vários estudos mostraram que os anticorpos policlonais no soro PV reagem principalmente com o aminoterminus de DSG3 nos subdomínios EC1 e EC2 (aminoácidos 1-161).

O isolamento de mAbs patogênicos é fundamental para abordar as questões quanto ao mecanismo que induz a resposta autoreativa e a formação de bolhas em pacientes com PV. Amagai e colegas de trabalho isolados de um modelo de mouse ativo de PV um anticorpo patogênico, AK23, que causa perda de adesão celular por ligação ao subdomínio EC1 do DSG3 que está envolvido na formação da interface trans-adesiva. Uma série de mAbs anti-DSG anti-DSG patogénicos e não patogénicos foram isolados como fragmentos de região variável de cadeia única (scFvs) de um paciente PV. De forma semelhante ao mAb AK23, a atividade patogênica desses anticorpos humanos foi mapeada para a região aminoterminal de EC1, que é mascarada pelo propeptídeo. Tomados em conjunto, os dados humanos e de ratos sugerem que os anticorpos patogénicos se ligam principalmente ao EC1 e perturbam a adesão dos queratinócitos interferindo com a interface trans-adesiva do DSG3.

Neste estudo, isolamos de pacientes com 2 PV vários autoanticorpos IgG que ligam DSG3. Esses anticorpos apresentaram altos níveis de mutações somáticas que foram necessárias para a ligação ao DSG3. Os epítopos reconhecidos pelos anticorpos patogénicos 3 foram mapeados para os subdomínios EC1 e EC2 em regiões que se espera que estejam envolvidas em interações cis-adesivo. Esta região foi considerada o principal alvo de autoanticorpos séricos em pacientes com PV. Esses resultados identificam a interface cis-adesivo como a região imunodominante alvo de anticorpos patogênicos em PV e sugerem que a autoreatividade depende de mutações somáticas desencadeadas por um antígeno não relacionado.

Artigo completo Disponível em: http://www.jci.org/articles/view/64413

MADAM, Autoanticorpos em pemphigus alvo preferencialmente desmoglein 1 (Dsg1) e Dsg3, e raramente desmocollins 1-3 (Dsc1-3). Pemphigus herpetiformis (PH) é um dos subtipos de pênfigo e caracteriza-se por eritemas anulares pruriginosos com vesículas na periferia, raridade do envolvimento mucoso e alteração histopatológica da espongiose eosinofílica. Recentemente, os autoanticorpos IgG anti-Dsc3 foram sugeridos para causar lesão na pele em um caso de pênfigo vulgar. Neste estudo, relatamos o primeiro caso de penfigóide bolhoso (BP) concorrente e PH com anticorpos IgG tanto para Dsgs quanto para Dscs.

a partir de: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/bjd.12019/abstract

Lemos com interesse o estudo de Koga H et al1 e acreditamos que, à luz de observações recentes, incluindo nossos dados (Tabela 1), a "teoria da compensação desmoglein" como uma explicação para a localização de bolhas deve ser revisada 2,3,4. Embora a destruição da adesão celular dependente de desmogleína por autoanticorpos seja a fisiopatologia básica subjacente à formação de bolhas no pênfigo 2-4, o espectro clínico nem sempre reflete esse processo patogênico. Três tipos clínicos de pênfigo foram descritos, o tipo mucosa dominante, cutâneo e mucocutâneo 2 ,, 3,4 .
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/bjd.12012/abstract

O penfigóide bolhoso (PA) é uma doença de pele com bolhas autoimunes. Os autoanticorpos para BP180 e BP230 podem ser detectados por imunofluorescência indireta (IIF) em diferentes substratos (esôfago, sal-split-skin, pontos de antígeno BP180, células transfectadas com BP230) e ELISA. Aqui, comparamos as características dos testes desses sistemas de teste. Analisamos soros de pacientes com PA (n = 60) em quem o diagnóstico clínico havia sido confirmado histopatologicamente. A coorte de controle compreendese soro de pacientes com outras doenças da pele auto-imunes (n = 22) ou inflamatórias (n = 35). Todas as amostras foram testadas por IIF (EUROIMMUN ™ Dermatology Mosaic) e ELISA (EUROIMMUN e MBL). Anti-BP180 é melhor detectado com pontos de antígeno BP180 por IIF (sensibilidade: 88%; especificidade: 97%). Em comparação com o IIF, as diferenças com ambas as técnicas de ELISA BP180 são pequenas. Razões de probabilidade (LRs) para resultados de testes positivos e negativos são> 10 e entre 0.1 e 0.2, respectivamente, para todos os sistemas de teste. A detecção de anti-BP230 é altamente variável (intervalo de sensibilidade 38-60%; intervalo de especificidade 83-98%). Somente o teste IIF revela uma LR para resultados de teste positivos> 10. Uma vez que os LRs para um teste negativo são todos ~ 0.5, os resultados de testes negativos para anticorpos anti-BP230 não ajudam a excluir a PA. Em conclusão, o teste multi-parâmetro IIF revela um bom desempenho de diagnóstico na PA. Uma vez que este teste permite simultaneamente a detecção de anticorpos anti-Dsg1 e anti-Dsg3, envolvidos em pemphigus foliaceus e vulgaris, uma única incubação de teste pode ser suficiente para se diferenciar entre as doenças de bolhas autoimunes mais frequentes.

Em conclusão, o teste multi-parâmetro IIF revela um bom desempenho de diagnóstico na PA. Uma vez que este teste permite simultaneamente a detecção de anticorpos anti-Dsg1 e anti-Dsg3, envolvidos em pemphigus foliaceus e vulgaris, uma única incubação de teste pode ser suficiente para se diferenciar entre as doenças de bolhas autoimunes mais frequentes. PMID: 22580378 [PubMed - em processo] (Fonte: Journal of Immunological Methods)
de MedWorm: Pemphigus http://www.medworm.com/index.php? rid = 6304089 & cid = c_297_3_f &fid = 33859 & url = http% 3A% 2F%2Fwww.ncbi.nlm.nih.gov%2FPubMed% 2F22580378% 3Fdopt%3DAbstract