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MedWire News: Pesquisadores identificaram o alvo primário dos autoanticorpos encontrados no soro de pacientes portadores do distúrbio cutâneo com bolhas, pênfigo vulgar (PV).

Os pacientes PV desenvolvem anticorpos contra as proteínas desmoglein (DSG) 1 e 3, que ajudam as células epidérmicas a manterem-se unidas e a manter a integridade da pele, causando bolhas dolorosas na pele e membranas mucosas.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Roma, Itália) e colegas descobriram que a interface cis-adesivo do domínio extracelular DSG3 (EC) 1 é o principal alvo do autoanticorpo PV (A) 224 gerado no soro de pacientes com PV.

As terapias existentes para a condição visam todo o sistema imunológico, mas isso pode causar problemas com efeitos colaterais e pode resultar em pacientes vulneráveis ​​a infecções.

Para identificar o desencadeante da produção de autoanticorpos em PV mais especificamente, Zambruno e equipe isolaram anticorpos 15 de imunoglobulina (Ig) G específicos para DSG3 de dois pacientes com o transtorno.

Destas, três camadas interrompidas de células da pele no laboratório e duas eram patogênicas quando expressas em um modelo de transferência passiva de murino.

Os epitopos reconhecidos pelos anticorpos patogênicos fotovoltaicos foram isolados nos subdomínios DSXXUMUM EC3 e EC1 e um ensaio serológico específico foi usado para identificar o alvo do PVA2 como sendo a interface cis-adesivo em EC224.

Os pesquisadores sugerem que a autoreatividade observada na PV é devida a mutações somáticas que são geradas por um antígeno diferente de DSG3, já que a ligação ao DSG3 desapareceu quando as mutações somáticas reverteram para a sequência da linha germinal.

"A identificação de uma região imunodominante visada por anticorpos patogênicos tem implicações para o diagnóstico de PV e abre novas perspectivas para o estabelecimento de abordagens terapêuticas para o tratamento de pacientes com PV", escreva Zambruno e equipe na Journal of Clinical Investigation.

"Finalmente, a versão gerada dos autoanticorpos PV pode levar à identificação dos antígenos que eventualmente levam ao desenvolvimento desta doença que ameaça a vida".

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Leia em: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

Pemphigus vulgaris (PV) é uma doença de bolhas autoimunes da pele e das membranas mucosas causadas por autoanticorpos às proteínas da família desmoglein (DSG) DSG3 e DSG1, levando a perda de adesão celular de queratinócitos. Para saber mais sobre autoanticorpos PV de patogenicidade, isolamos os anticorpos 15 IgG específicos para DSG3 de pacientes com 2 PV. Três anticorpos interromperam as monocapas de queratinócitos in vitro e 2 eram patogênicos em um modelo de transferência passiva em camundongos neonatais. Os epítopos reconhecidos pelos anticorpos patogênicos foram mapeados para os subdomínios extracelulares 3 (EC1) e EC1 DSG2, regiões envolvidas em interações cis-adesivo. Usando um ensaio sorológico específico do local, descobrimos que a interface cis-adesivo no EC1 reconhecida pelo anticorpo patogênico PVA224 é o principal alvo dos autoanticorpos presentes no soro de pacientes com PV. Os autoanticorpos isolados usaram diferentes genes da região variável de cadeia pesada e leve e apresentaram altos níveis de mutações somáticas em regiões determinantes complementares, consistentes com a seleção antigênica. Notavelmente, a ligação ao DSG3 foi perdida quando as mutações somáticas foram revertidas para a sequência da linha germinal. Esses achados identificam a interface cis-adesivo do DSG3 como a região imunodominante alvo de anticorpos patogênicos em PV e indicam que a autoreatividade depende de mutações somáticas geradas na resposta a um antígeno não relacionado ao DSG3.

Pemphigus vulgaris (PV) é uma doença de bolhas autoimunes e ameaçadoras para a pele e mucosas causadas por autoanticorpos que se ligam às moléculas de adesão de células celulares de caderina desmoglein 3 (DSG3) e DSG1, os principais constituintes de desmossomas e causam a perda de adesão celular de queratinócitos. O papel crítico dos autoanticorpos na patogênese PV é suportado pelas observações de que a atividade da doença se correlaciona com os títulos de anticorpos anti-DSG3, que os recém-nascidos de mães com PV ativado exibem bolhas causadas pela transferência placentária de anticorpos maternos e que lesões tipo pemphigus são induzida em camundongos neonatais por transferência passiva de IgG anti-DSG3 de pacientes com PV.

Na pele, o DSG3 é principalmente expresso nas camadas basal e suprabasal, enquanto o DSG1 é predominantemente expresso nas camadas epidérmicas superiores. Em contraste, em epitélios estratificados não codornizados, como a mucosa oral, o DSG3 é altamente expresso em todo o epitélio, enquanto o DSG1 é expresso em um nível muito mais baixo. O padrão de expressão diferencial de DSG1 e DSG3 é responsável por variantes clínicas do pênfigo: anticorpos contra DSG3 estão presentes na forma mucosa, enquanto os anticorpos para DSG3 e DSG1 estão associados a lesões mucocutâneas.

DSG3 é uma glicoproteína de membrana de ligação ao cálcio com um domínio extracelular compreendendo subdomínios distintos de 5 (EC1-EC5), e é sintetizada como proproteína, que é processada no aparelho de Golgi pela remoção de um propéptido antes de transportar para a superfície celular. A clivagem do propeptídeo ocorre a montante de um resíduo de triptofano conservado no subdomínio EC1, desenmascarando resíduos críticos para a formação de interações homofílicas com DSG3 em células opostas. Vários estudos mostraram que os anticorpos policlonais no soro PV reagem principalmente com o aminoterminus de DSG3 nos subdomínios EC1 e EC2 (aminoácidos 1-161).

O isolamento de mAbs patogênicos é fundamental para abordar as questões quanto ao mecanismo que induz a resposta autoreativa e a formação de bolhas em pacientes com PV. Amagai e colegas de trabalho isolados de um modelo de mouse ativo de PV um anticorpo patogênico, AK23, que causa perda de adesão celular por ligação ao subdomínio EC1 do DSG3 que está envolvido na formação da interface trans-adesiva. Uma série de mAbs anti-DSG anti-DSG patogénicos e não patogénicos foram isolados como fragmentos de região variável de cadeia única (scFvs) de um paciente PV. De forma semelhante ao mAb AK23, a atividade patogênica desses anticorpos humanos foi mapeada para a região aminoterminal de EC1, que é mascarada pelo propeptídeo. Tomados em conjunto, os dados humanos e de ratos sugerem que os anticorpos patogénicos se ligam principalmente ao EC1 e perturbam a adesão dos queratinócitos interferindo com a interface trans-adesiva do DSG3.

Neste estudo, isolamos de pacientes com 2 PV vários autoanticorpos IgG que ligam DSG3. Esses anticorpos apresentaram altos níveis de mutações somáticas que foram necessárias para a ligação ao DSG3. Os epítopos reconhecidos pelos anticorpos patogénicos 3 foram mapeados para os subdomínios EC1 e EC2 em regiões que se espera que estejam envolvidas em interações cis-adesivo. Esta região foi considerada o principal alvo de autoanticorpos séricos em pacientes com PV. Esses resultados identificam a interface cis-adesivo como a região imunodominante alvo de anticorpos patogênicos em PV e sugerem que a autoreatividade depende de mutações somáticas desencadeadas por um antígeno não relacionado.

Artigo completo Disponível em: http://www.jci.org/articles/view/64413